附录A。规范性附录。细菌定量杀灭试验A.1,试验原理.将规定浓度的细菌悬液以一定比例与酸性电解水混合、作用至规定的时间后加入中和剂、终止酸性电解水的杀菌活性 进行活菌计数，然后与阳性对照组细菌悬液中的菌落数进行比较 以确定其杀菌效果，A。2，悬液定量杀菌试验A,2，1，菌悬液的制备A。2 1,1、按 消毒技术规范、2002年版.要求将细菌繁殖体和枯草杆菌黑色变种芽孢制成2。109CFU。mL 9.109CFU.mL的试验用菌悬液.A、2.1、2。按,消毒技术规范，2002年版，要求将白色念珠菌制成2。108CFU,mL、9 108CFU mL的试验用菌悬液 A,2，2.悬液定量杀菌试验操作程序A 2.2。1、开启生成器。待产生的酸性电解水中有效成分处于稳定状态时,用250mL磨口锥形瓶接取满瓶后。盖好瓶盖.置20、1 水浴备用.A、2。2、2.取消毒试验用无菌大试管,先加入0,05mL试验用菌液，再加入0、05mL有机干扰物质，混匀、置20,1，水浴中5min后、用无菌吸管吸取酸性电解水9 9mL注入其中。迅速混匀并立即计时。A,2。2 3 待试验菌与消毒剂相互作用至各预定时间.分别吸取0。5mL试验菌与酸性电解水的混合液加于含4、5mL中和剂。0。1。硫代硫酸钠 0，1.吐温80的生理盐水，的试管中,混匀.作用10min后,分别吸取1、0mL样液、按活菌培养计数方法测定存活菌数 每管样液接种2个平皿，如平板上生长的菌落数较多时。可进行系列10倍稀释后、再进行活菌培养计数、A.2，2 4 同时用标准硬水代替酸性电解水 进行平行试验。作为阳性对照.A 2,2 5,所有试验样本均在37，温箱中培养、对细菌繁殖体培养48h观察最终结果,对细菌芽孢和白色念珠菌需培养72h观察最终结果 A.2.2.6。试验重复3次 包括对照。计算各组的活菌浓度,CFU。mL 并换算为对数值.N.然后按式。A 1。计算杀灭对数值。A、2 3，杀灭对数值的计算,计算各组的活菌浓度。CFU。mL。并换算为对数值、N，然后按式,A、1 计算杀灭对数值。KL.N0，Nx.A、1,式中 KL,杀灭对数值。N0、对照组平均活菌浓度的对数值 Nx 试验组活菌浓度对数值，计算杀灭对数值时.取小数点后两位值。可以进行数字修约 但是。如果消毒试验组消毒处理后平均生长菌落数小于1CFU。杀灭对数值即大于或等于对照组平均活菌浓度的对数值 KL.lg.N0、A,2,4 评价规定.取酸性电解水原液与3个作用时间、重复试验3次.在最短作用时间，以及最短作用时间的1 5倍时,对大肠杆菌,金黄色葡萄球菌,铜绿假单胞菌。枯草杆菌黑色变种芽孢、各次试验的杀灭对数值均.5.00,对白色念珠菌、各次试验的杀灭对数值均。4 00,判定为消毒合格,A,2 5，注意事项A.2、5,1。试验中所使用的中和剂，稀释液和培养基等,各批次均应进行无菌检查。发现有菌生长,则全部试验需换用未污染试剂或培养基重做，A.2，5。2.进行细菌液定量杀菌试验时,对用于清洗物品的消毒或用于冲洗浸泡消毒。有机干扰物质采用0，3、3g，L、牛血清白蛋白、对未清洗的物品或有机物较多的物品的消毒 有机干扰物采用3。30g L.牛血清白蛋白，