附录B、规范性附录，脊髓灰质炎病毒灭活试验B 1.试验原理。将规定感染滴度的脊髓灰质炎病毒悬液以一定比例与酸性电解水混合。作用至规定的时间后加入中和剂 终止酸性电解水的灭活作用、接种细胞 进行残留病毒感染滴度测定。然后与阳性对照组的病毒感染滴度进行比较.以确定其对病毒的灭活效果 B，2 灭活试验方法,脊髓灰质炎病毒、型疫苗株 悬液的制备按，消毒技术规范。2002年版、进行 B,3。脊髓灰质炎病毒灭活试验操作步骤B。3.1.取脊髓灰质炎病毒液0，05mL加到无菌试管中,再加入0、05mL有机干扰物，然后加入4，9mL酸性电解水，混匀、于20，水域中作用至规定时间、B、3，2。取0 1mL病毒与酸性电解水混合液 加入到含0,9mL中和剂的试管中.振打混合后、取样按,消毒技术规范,2002年版.2。1。1.10 4所示方法检测残留脊髓灰质炎病毒滴度、B，3，3。阳性对照,用细胞维持液代替酸性电解水、其余步骤与试验组相同。B、3 4.阴性对照、用不含脊髓灰质炎病毒的完全培养基作为阴性对照、以观察培养基无污染,细胞是否生长良好，B 3。5。试验重复3次,B。3，6。根据各组的平均病毒感染滴度.TCID50，分别计算其对病毒的灭活对数值。B、4，评价规定。对脊髓灰质炎病毒,在3次试验中,阳性对照组病毒对数值为5,7。灭活对数值,4.00 判为消毒合格.B,5 注意事项B，5。1 对有机干扰物的要求与A.2、5。2相同。B。5。2，在病毒灭活试验中，每次均应设置阳性对照。B 5，3,脊髓灰质炎病毒灭活试验操作应在生物安全,级以上实验室内进行。避免造成操作人员实验室感染和对环境污染.B。5 4,操作人员应具有基本的病毒学实验工作经验.量使用移液器与无菌一次性吸头.