E 8。悬浮微生物的检测E.8.1 悬浮微生物的采样装置有以下两类、1 采用无源采样装置。如培养皿 2,采用有源采样装置.如撞击采样器，离心采样器,过滤采样器 E.8.2、空气洁净环境中悬浮微生物的静态或空态检测前。应对各类表面进行擦拭消毒，但不得对室内空气进行熏蒸。喷洒之类的消毒，动态检测均不得对表面和空气进行消毒、E 8、3 沉降菌检测应符合下列要求.1.使用直径90mm.Φ90。的培养皿采样,当采用其他直径培养皿时,应使其总面积和Φ90皿总面积相当.2。培养皿中灌注胰蛋白酶大豆琼脂培养基，必须留样作阴性对照。3，培养皿表面应经适当消毒清洁处理后,布置在有代表性的地点和气流扰动极小的地点、在乱流洁净室内培养皿不应布置在送风口正下方。4。当用户没有特定要求时 培养皿应布置在地面及其以上0.8m之内的任意高度。5,每一间洁净室或每一个控制区应设1个阴性对照皿 6、动态监测时也可协商布点位置和高度。7、培养皿数应不少于微粒计数浓度的测点数。如工艺无特殊要求应大于等于表E。8。3中的最少培养皿数,另外各加1个对照皿.8,当延长沉降时间时。可按比例减少最少培养皿数。为防止脱水。最长沉降时间不宜超过1h、当所需沉降时间超过1h、可重叠多皿连续采样，除非经过验证,证明更长的沉降时间可以基本按比例增加菌落数。9,培养皿应从内向外布置、从外向内收皿,10,每布置完1个皿,皿盖只允许斜放在皿边上、对照皿盖挪开即盖上、11,布皿前和收皿后.均应用双层包装保护培养皿,以防污染,12,收皿后皿应倒置摆放。并应及时放入培养箱培养 在培养箱外时间不宜超过2h.如无专业标准规定、对于检测细菌总数 培养温度采用。35。37、培养时间为，24 48、h 对于检测真菌 培养温度,27,29 培养时间3d,13。布皿和收皿的检测人员必须穿无菌服 但不得穿大褂、头,手均不得裸露、裤管应塞在袜套内，并不得穿拖鞋，14,对培养后的皿上菌落计数时、应采用5.10倍放大镜查看.若有2个或更多的菌落重叠,可分辨时则以2个或多个菌落计数。15、当单皿菌落数太大受到质疑时。可按以下原则之一进行处理,1，作为坏点剔除、2，重测、如结果仍大.以两次平均值为准 如结果很小.可再重测,3。重测该处微粒浓度 参考此结果作出判断,所有上述处理方法均应记录在案,16。每皿平均菌落数取到小数点后1位。17 动态监测时每点叠放多个平皿或采用可自动切换的仪器.每点应采满4h以上 每皿可采30min 当只放1个皿时。可少于4h。但不可少于1h。E,8.4，浮游菌采样应符合下列要求,1、使用单级或多级撞击式采样器,离心采样器或过滤采样器.采样必须按所用仪器说明书的步骤进行、特别要注意检测之前对仪器消毒火菌、并对培养皿或培养基条做阴性对照。2。采样点数应不少于微粒计数浓度测点数.3、采样点应在离地0，8m高平面上均匀布置，或经委托方、用户。与检测方协商确定.乱流洁净室内不得在送风口正下方布点，静态或空态检测前对室内各种表面应作擦拭消毒。4、每点采样1次、如工艺无特殊要求、每次采样量应大于等于表E，8，4推荐的浮游菌最小采样量、每次采样时间不宜超过15min.不应超过30min.当洁净度很高,或预期含菌浓度可能很低时。采样量应大于最小采样量很多。以满足减少计数误差的要求，5 采样器应用支架固定、采样时检测人员应退出，手持离心式采样器除外。检测人员的穿戴同本附录E 8.3条第15款、必须手持采样器时、应将手臂伸直 站于下风向，6.采样后宜在2h之内将采样器中的培养皿或培养基条送入培养箱中培养.7、每点平均值取到小数点后1位，8，动态监测的测点位置、数量和高度由工艺并经协商确定.每间洁净室或每一个独立受控环境中各点总采样量 不分级别.均应大于1m3，每点可用多台采样器 9 单点菌落数太大时.应按附录E。8、3条第15款的原则处理,E、8,5.表面染菌密度检测应符合下列要求,1、对于洁净室内围护结构.设备等表面的微生物采样,应采用无菌棉拭子擦抹法、当表面很大、硬且平时,也可采用接触皿法 2,用规格板标定出面积为25cm2的区块、对于围护结构、每面结构不少于4块 对于设备.每件不少于2块。取样地点均协商确定，3。将无菌棉拭于含10mL稀释液试管中浸湿,于管壁上挤干后.对一区块擦抹采样 横竖往返8次。每一区块使用1根无菌棉拭、采样后 以无菌操作方式将棉拭采样端剪入原稀释液试管中。经电动混匀器震荡20s或在手掌振打200次.4 取含菌液体1.0mL 以琼脂灌注法接种平皿。每个样本接种2个平皿。于，35 37、培养箱中培养、24。48、h后计数.5 必须将本次检测所用的稀释液.棉拭子 培养基等留样作阴性比照、6，具体事项遵照卫生部 消毒技术规范，执行,7 对于适用接触皿采样的表面，以无菌操作方式。先将培养基注入硬质或软质Φ55平皿、使培养基表面高出培养皿周边,测试时 将培养皿倒过来、使培养基表面均匀牢固地按压住整个区域5s，不得有环形或线性的运动、8、对于围护结构 每面结构应用不少于4个培养皿按压。对于设备.每件用不少于2个培养皿按压,9,按压取样后的培养皿。应在2h之内、于、35.37、培养箱中培养、24 48。h后计数，10，菌数平均数取到小数点后1位、